TRNzol Universal Reagent
Nta
Flexibility Muaj qhov hloov pauv tau yooj yim: Cov tsiaj qus ntawm qhov pib ua qauv ntim, haum rau qhov ntim ntau qhov piv txwv rho tawm hauv ib qho kev tawm tsam.
Yield Cov txiaj ntsig siab: Cov txheej txheem nag los ua kom tau txiaj ntsig ntau ntawm RNA hauv cov qauv.
■ Kev siv dav: haum rau ntau qhov piv txwv xws li cov nroj tsuag thiab tsiaj cov nqaij, kab lis kev cai hauv lub cev, ntshav, ntshav lub cev, thiab lwm yam.
Operation Kev ua haujlwm nrawm: Genomic DNA tuaj yeem tau txais hauv 1 teev.
Kev qhia tshwj xeeb
Hom: Dej nag raws
Qauv: Kab mob, kab mob, fungus, tsiaj, cov nqaij cog, cog qoob loo thiab cov kua hauv lub cev.
Lub hom phiaj: RNA
Lub sijhawm ua haujlwm: ~ 1 teev
Cov ntawv thov: TRNzol Universal reagent txo qis kev sib kis ntawm impurities xws li DNA thiab cov protein hauv cov purified tag nrho RNA, thiab tuaj yeem siv ncaj qha rau ntau yam kev sim tshuaj lom neeg keeb kwm xws li Northern Blot, Dot Blot, PolyA tshuaj ntsuam, hauv vitro txhais lus, RNase tiv thaiv kev tshuaj xyuas, cDNA tsev qiv ntawv tsim , RT-PCR, PCR lub sijhawm tiag tiag thiab kev ua tiav siab dhau los.
Txhua yam khoom tuaj yeem tsim kho rau ODM/OEM. Yog xav paub ntxiv,thov nyem Customized Service (ODM/OEM)
Txoj hauv kev: 30 mg nas daim siab nqaij, 100 mg nplej nplooj tau sau los ntawm cov kua nitrogen sib tsoo; 1 × 106HepG2 cultured cells thiab 700 μl Saccharomyces Cerevisiae culture medium (OD600 = 0.9) tau sau los ntawm centrifugation. 1 ml ntawm TRNzol Universal Reagent los ntawm TIANGEN thiab cov khoom lag luam cuam tshuam los ntawm tus xa khoom L thiab T tau ntxiv rau txhua qhov txiaj ntsig ntawm cov qauv thiab RNA rho tawm tau ua raws cov kev cai muab los ntawm txhua tus neeg xa khoom. Qhov ntim tawm yog 80 μl, 50 μl, 30 μl thiab 30 μl rau plaub qhov piv txwv. 3 μl ntawm cov eluate tau thauj khoom ib txoj kab.
MIII: TIANGEN Marker III;
Cov electrophoresis tau ua ntawm 6 V/cm rau 30 feeb ntawm 1% agarose.
Cov txiaj ntsig: TIANGEN TRNzol Universal Reagent tuaj yeem tshem tawm qhov ua kom huv thiab muaj lub siab zoo RNA los ntawm nas lub siab, nplej nplooj, cog qoob loo thiab kuaj cov poov xab, nrog kev ua haujlwm siab. RNA zoo yog piv rau lossis siab dua me ntsis ntawm cov khoom lag luam L thiab T cov khoom lag luam.
A-1 Cell lysis lossis homogenization tsis txaus
---- Txo cov qauv siv, nce tus nqi ntawm lysis tsis, nce homogenization thiab lysis lub sijhawm.
A-2 Cov qauv piv txwv loj heev
---- Txo tus nqi siv piv txwv lossis nce tus nqi ntawm lysis tsis.
A-1 Tsis txaus lysis ntawm tes lossis homogenization
---- Txo cov qauv siv, nce tus nqi ntawm lysis tsis, nce homogenization thiab lysis lub sijhawm.
A-2 Cov qauv piv txwv loj heev
---- Thov xa mus rau lub peev xwm ua tiav siab tshaj plaws.
A-3 RNA tsis raug tshem tawm ntawm kab ntawv
---- Tom qab ntxiv RNase-Dawb dej, tso nws li ob peb feeb ua ntej centrifuging.
A-4 Ethanol hauv qhov tsim nyog
---- Tom qab yaug, cov centrifuge dua thiab tshem cov tshuaj ntxuav kom ntau li ntau tau.
A-5 Cell kab lis kev cai nruab nrab tsis raug tshem tawm kiag li
---- Thaum khaws cov cell, thov nco ntsoov tshem cov kab lis kev cai nruab nrab kom ntau li ntau tau.
A-6 Cov cell khaws cia hauv RNAstore tsis ua haujlwm zoo
---- RNAstore ntom ntau dua li qhov nruab nrab ntawm kab lis kev cai ntawm tes; yog li lub zog centrifugal yuav tsum tau nce. Nws tau pom zoo kom centrifuge ntawm 3000x g.
A-7 Cov ntsiab lus RNA qis thiab muaj ntau hauv cov qauv
---- Siv qhov piv txwv zoo los txiav txim siab tias qhov txiaj ntsig qis yog tshwm sim los ntawm cov qauv.
A-1 Cov khoom siv tsis tshiab
---- Cov ntaub so ntswg tshiab yuav tsum khaws cia hauv cov kua nitrogen tam sim lossis tam sim muab tso rau hauv RNAstore reagent kom ntseeg tau tias cov txiaj ntsig rho tawm.
A-2 Cov qauv piv txwv loj heev
---- Txo tus nqi qis.
A-3 RNase kev sib kisn
---- Txawm hais tias qhov tsis nyob hauv cov khoom siv tsis muaj RNase, nws yooj yim rau kis RNase thaum lub sijhawm txheej txheem rho tawm thiab yuav tsum tau ua nrog kev saib xyuas.
A-4 Electrophoresis paug
---- Hloov cov electrophoresis tsis thiab ua kom ntseeg tau tias cov khoom siv thiab Loading Tsis pub dawb ntawm RNase paug.
A-5 Kev thauj khoom ntau dhau rau electrophoresis
---- Txo tus nqi ntawm cov qauv thauj khoom, kev thauj khoom ntawm txhua lub qhov dej yuav tsum tsis pub tshaj 2 μg.
A-1 Tus nqi piv txwv loj heev
---- Txo tus nqi qis.
A-2 Qee qhov piv txwv muaj cov ntsiab lus DNA siab thiab tuaj yeem kho nrog DNase.
---- Ua RNase-DNase Kho DNase kom tau txais RNA daws, thiab RNA tuaj yeem siv ncaj qha rau kev sim tom ntej tom qab kho, lossis tuaj yeem ua kom huv ntxiv los ntawm RNA cov khoom siv ua kom huv.
Rau cov iav, ci ntawm 150 ° C rau 4 h. Rau cov ntim yas, raus rau hauv 0.5 M NaOH rau 10 feeb, tom qab ntawd yaug kom huv nrog RNase tsis pub dej thiab tom qab ntawd ua kom tsis huv kom tshem tawm RNase. Cov tshuaj reagents lossis cov kev daws teeb meem siv hauv kev sim, tshwj xeeb tshaj yog dej, yuav tsum tsis pub dawb ntawm RNase. Siv RNase-dawb dej rau txhua qhov kev npaj ua tshuaj reagent (ntxiv dej rau hauv lub khob iav huv, ntxiv DEPC mus rau qhov kawg ntawm 0.1% (V/V), co thaum hmo ntuj thiab autoclave).
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